期刊简介
1981年3月创刊，中华医学会主办。本刊是反映了我国麻醉学临床、科研发展的水平，促进了国内外麻醉学科的学术交流，引导着我国麻醉学的发展方向；杂志发行世界104个国家，编委会中有美国、加拿大、新加坡、台湾地区、香港地区的国际知名专家加盟，被《化学文摘》等国际检索系统收录，且荣登《化学文摘》千刊表；首批获准加入WHO西太平洋地区医学索引。曾荣获 “百种中国杰出学术期刊”及“中国精品科技期刊”称号。
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首页>中华麻醉学杂志
- 杂志名称：中华麻醉学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0254-1416
- 国内刊号：13-1073/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：先后荣获历届河北省优秀期刊奖、获国家新闻出版总署印刷优质产品奖及中华医学会银奖期刊收录：维普收录(中), 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
稳定表达重组成人型和胎儿型乙酰胆碱受体细胞株的构建
杨斌；周雅春；王宏；李士通
关键词：受体, 胆碱能, 细胞系, 肾
摘要：目的 稳定表达重组成人型乙酰胆碱受体(ε-nAChR)和胎儿型乙酰胆碱受体(γ-nAChR)细胞株的构建.方法 通过亚克隆技术将含有乙酰胆碱受体亚基基因的原核细胞表达质粒pSP65a、pSP65β、pSP64γ、pSP65δ和pBssKε分别连接到真核细胞表达质粒pcDNA3.1构建阳性重组子pcDNA3.1α、pcDNA3.1β、pcDAN3.1γ、pcDNA3.Iδ及pcDNA3.1ε,并将含有α、β、δ、ε或α、β、δ、γ亚基基因的重组子按摩尔比2:1:1:1(质粒总量<1.5μg)转染HEK293细胞.采用G418筛选出有ε或γ亚基基因表达的阳性细胞株,再采用免疫荧光法筛选出表达ε-nAChR或γ-nAChR的细胞株,进一步采用全细胞膜片钳技术选出乙酰胆碱诱发ε-nAChR或γ-nAChR产生内向电流的细胞株.结果 酶切鉴定结果显示pSP65α、pSP65β、pSP64γ、pSP65δ和pBssKε均正确定向插入pcDNK3.1.未传代、连续传10代及冻存并复苏的表达ε-nAChR和γ-nAChR的细胞株均可呈现稳定的免疫荧光,荧光主要分布在细胞膜表面.乙酰胆碱刺激后,6株转染ε-nAChR的细胞上记录到100～400 pA内向电流,3株转染γ-nAChR的细胞上记录到200～600 pA内向电流.结论 成功构建出稳定表达ε-nAChR和γ-nAChR的细胞株.
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