期刊简介

               1981年3月创刊,中华医学会主办。本刊是反映了我国麻醉学临床、科研发展的水平,促进了国内外麻醉学科的学术交流,引导着我国麻醉学的发展方向;杂志发行世界104个国家,编委会中有美国、加拿大、新加坡、台湾地区、香港地区的国际知名专家加盟,被《化学文摘》等国际检索系统收录,且荣登《化学文摘》千刊表;首批获准加入WHO西太平洋地区医学索引。曾荣获 “百种中国杰出学术期刊”及“中国精品科技期刊”称号。                

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  • 杂志名称:中华麻醉学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0254-1416
  • 国内刊号:13-1073/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:先后荣获历届河北省优秀期刊奖、获国家新闻出版总署印刷优质产品奖及中华医学会银奖期刊收录:维普收录(中), 知网收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
中华麻醉学杂志2006年第08期

转IκBα突变型基因永生化神经前体细胞株的构建

刘志恒;祝畅;桂伶俐;姚文龙;张传汉

关键词:I-κB, 神经元, 基因表达
摘要:目的 构建转IκBα突变型基因永生化神经前体细胞株(INPCs).方法 限制性内切酶双酶切含IκBα突变型基因的质粒pBluescript/CNP/IκBαM,得到目的 基因片断IκBα突变型基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,酶切反应及DNA测序鉴定重组载体pcDNA3.1/IκBαM.利用脂质体介导的基因转染技术分别将载体pcDNA3.1及pcDNA3.1/IκBαM转染INPCs,经G418(150μg/ml)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养,2周后用RT-PCR和Western blot检测阳性细胞株中IκBα的表达,用受NF-κB特异性启动表达的荧光素酶报告基因检测阳性细胞株中NF-κB的活性.结果 经限制性酶切分析及DNA测序证实重组载体pcDNA3.1/IκBαM中含有IκBα突变型基因,转pcDNA3.1/IκBαM永生化神经前体细胞中IκBα的总mRNA表达增高,Western blot可检测到突变型IκBα蛋白的表达,且细胞中NF-κB活性下降.结论 成功构建了转IκBα突变型基因INPCs,该细胞株能通过IκBα突变型基因的表达来下调NF-κB的活性.